摘要
目的通过顺铂(cisplatin,DDP)诱导卵巢癌细胞珠SKOV3建立耐药细胞株SKOV3/DDP,并研究其与凋亡途径蛋白的关系。方法应用倒置显微镜观察DDP对细胞形态的影响,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测DDP对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的增殖抑制情况,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡率以及细胞中X链锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor-of-apoptosis protein,XIAP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine-aspartic acid protease-3,Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)和生存素(Survivin)的表达情况。结果 MTT法检测发现DDP作用后,SKOV3/DDP细胞的增殖抑制率较SKOV3细胞显著降低(P<0.01),且存在着浓度和时间依赖效应(P<0.01)。由半数抑制浓度(50%concentration of inhibition,IC50)比较得SKOV3/DDP细胞24、48、72h耐药指数(resistance index,RI)分别为2.434、2.950、3.780。FCM检测表明,DDP作用后,SKOV3/DDP凋亡率显著低于SKOV3细胞(P<0.01)。与SKOV3细胞相比,SKOV3/DDP细胞中XIAP、Bcl-2、Survivin蛋白高表达,Caspase-3蛋白低表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功建立卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP,其耐药机制可能与X1AP、Caspase-3、Bcl-2和Survivin蛋白的异常表达有关,表明这些蛋白参与了卵巢癌DDP耐药的形成。
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单位河北医科大学第四医院; 河北女子职业技术学院