人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品的建立

作者：胡泽斌; 高飞; 孙楠; 孙彬裕; 李丽莉; 孙晶; 曲守方^*; 黄杰^*

来源：分子诊断与治疗杂志, 2020, 12(10): 1285-1293.

• 人类白细胞抗原
• B27
• SBT测序法
• 国家参考品
• 协作标定

目的建立人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品。方法采集HLA-B27阳性和阴性志愿者的新鲜外周血,经EB病毒转化,培养建立永生化细胞系。提取细胞基因组DNA,制备成国家参考品并经高通量测序验证。用4家协作标定单位的HLA-B27核酸检测试剂,采用荧光PCR法、PCR-SSP法、SBT测序法对国家参考品进行定值,并进行国家参考品的复溶(在-20℃和25℃之间反复冻融3次)稳定性和均匀性研究。结果成功制备HLA-B27国家参考品,包含3例HLA-B27阳性DNA样本和7例HLA-B27阴性DNA样本。经荧光PCR法、PCR-SSP法、SBT测序法协作标定,参考品定值准确。参考品均匀性结果一致,参考品复溶3次后仍然稳定。结论人类白细胞抗原B27核酸检测国家参考品的各项指标均符合要求,可用于人类白细胞抗原B27核酸检测试剂盒的性能评价。

• 单位
  中国食品药品检定研究院