莱茵衣藻CrGPAT基因的克隆及分析

作者：贺志敏; 张峻鑫; 于丽平; 胡康; 石睿; 黄体冉; 杨明峰^*

来源：北京农学院学报, 2023, 38(03): 12-15.

DOI：10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2023.0303

• 莱茵衣藻
• GPAT
• 基因克隆
• 生物信息学

【目的】探究CrGPAT在莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)油脂合成中的作用。【方法】通过RT-PCR方法克隆了莱茵衣藻CrGPAT基因，对其理化性质、信号肽、蛋白结构域、高级结构进行分析，构建系统发育树。采用荧光定量PCR检测CrGPAT基因表达量。【结果】结果表明，CrGPAT基因编码区全长为1 233 bp,共编码410个氨基酸。GPAT相对分子质量为102 kDa,等电点为4.94,平均疏水性为0.805,脂肪系数为17.85,分子式为C3536H5841N1233O1442S415,不稳定指数为45.30,属于不稳定蛋白质，为非分泌蛋白且不具有信号肽和蛋白跨膜区。二级结构预测表明CrGPAT蛋白由4种结构组成，其中α螺旋占43.17%,是CrGPAT蛋白最主要的二级结构。同时，系统发育分析表明，CrGPAT与团藻(Volvox)亲缘关系最近。【结论】CrGPAT能够在衣藻体内正常表达且在缺氮条件下表达量会显著提高，为进一步提高莱茵衣藻体内油脂含量提供理论依据。

• 单位
  北京农学院