整合素β1通过ILK/FAK/F-actin通路影响幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞自噬的研究

作者：杜运秋; 张锐清; 曲磊; 程雪; 吴玉龙; 赵慧琳; 张莹^*; 李波清^*

来源：中国病原生物学杂志, 2020, 15(09): 1028-1037.

DOI：10.13350/j.cjpb.200907

• 幽门螺杆菌
• 整合素β1
• GES-1细胞
• 整合素连接激酶
• 细胞自噬

目的观察整合素β1对ILK/FAK/F-actin通路的调节作用,分析其对幽门螺杆菌(Hp)诱导GES-1细胞自噬的影响。方法利用siRNA沉默GES-1细胞整合素β1的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测ILK的表达。以ILK特异性抑制剂Cpd22抑制细胞ILK的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测LC3B、p62、FAK、Paxillin的表达;制备细胞爬片,以iFluor-594标记的鬼笔环肽对F-actin进行染色,观察细胞形态。结果沉默整合素β1后,空白组、Hp组、沉默组、阴性对照组、沉默+Hp组、阴性对照+Hp组ILK相对表达量分别为1.012±0.073、0.637±0.216、0.727±0.173、1.173±0.177、0.712±0.160、0.983±0.119,与空白组相比,Hp组ILK的相对表达量降低(t=3.288,P<0.05),沉默组较阴性对照组,沉默+Hp组较阴性对照+Hp组ILK相对表达量均显著降低(t值分别为-4.420和-3.238,均P<0.01)。抑制ILK表达后,空白组、Cpd22组、Hp组、Cpd22+Hp组LC3B的相对表达量分别为0.437±0.064、0.808±0.116、0.812±0.130、1.247±0.201,p62相对表达量分别为0.904±0.141、1.121±0.105、1.392±0.110、0.960±0.103,与空白组相比,Cpd22和Hp组细胞内LC3B及p62相对表达量均显著增加(t值分别为-4.838、-4.479、-3.269、3.313,均P<0.01),Cpd22+Hp组较Hp组细胞LC3B的相对表达量增高(t=-3.147,P<0.05),p62相对表达量降低(t=2.907,P<0.05)。Cpd22组FAK、Paxillin相对表达量较空白组均增加(t值分别为-2.303、-3.460,均P<0.05),Cpd22+Hp组FAK、Paxillin相对表达量较Hp组均降低(t值分别为2.446、-2.648,P<0.05),Cpd22抑制ILK后感染Hp,细胞F-actin染色呈现明显杂乱碎丝状。结论整合素β1通过上调ILK的表达抑制幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞自噬,其机制可能与FAK/Paxillin/F-actin通路有关。

• 单位
  滨州医学院