山羊痘病毒和绵羊痘病毒荧光PCR检测方法的建立与应用

作者：啜微微; 耿庆华^*; 赵永刚; 孟祥勇; 张敏; 韩小虎; 赵治国; 付海滨

来源：农业与技术, 2023, 43(09): 93-97.

DOI：10.19754/j.nyyjs.20230515021

• 山羊痘病毒
• 绵羊痘病毒
• 荧光PCR方法

为了建立山羊痘病毒(Goat pox virus, GTPV)和绵羊痘病毒(Sheep pox virus, SPPV)快速荧光PCR检测方法，本研究对2种病毒的保守基因P32基因在GeneBank上进行Blast比对，设计合成特异性荧光PCR引物和探针，构建了该病原特异性基因P32的重组质粒。建立了可以同时检测山羊痘病毒和绵羊痘病毒荧光PCR方法，对方法的特异性、敏感性和重复性进行研究，结果显示该方法具有高度的特异性，除了识别山羊痘病毒和绵羊痘病毒基因组外，对羊的基因组及山羊和绵羊常见病原的基因组均不发生交叉反应。在敏感性和重复性实验中，该方法对山羊痘病毒和绵羊痘病毒的检测限为1000Copies·mL-1,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测实验室模拟制备的样品，检测结果与预期相符合。

• 单位
  沈阳农业大学; 中国动物卫生与流行病学中心