腺相关病毒主要调控蛋白Rep78的表达及其与HBV-X基因启动子的体外结合

作者：刘天会; 丛敏; 王萍; 唐淑珍; 王宝恩; 贾继东; 尤红

来源：首都医科大学学报, 2006, 27(04): 423-426.

DOI：10.3969/j.issn.1006-7795.2006.04.001

• 腺相关病毒
• 乙肝病毒
• Rep78
• 凝胶电脉阻滞实验

目的对腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)Rep78蛋白对乙肝病毒X启动子(HBV-X promoter)的可能作用进行初步研究。方法利用pMAL-Rep78(含有Rep78全长基因的表达质粒)在大肠杆菌中表达并纯化得到带有AAVRep78蛋白的MBP-rep78融合蛋白;通过SDS-电泳及免疫印迹(Western blot)鉴定蛋白表达。合成地高辛标记的X启动子3段探针;以非放射性凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测Rep78与HBV-X启动子的结合。结果得到纯化的MBP-rep78融合蛋白;EMSA结果显示Rep78蛋白在体外能够与HBV-X启动子DNA结合,并有剂量依赖关系。结论AAVRep78可以与HBV-X启动子结合。

• 单位
  首都医科大学附属北京友谊医院