鸡传染性贫血病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立及应用

作者:孙文杰; 宋亚鹏; 刘琳; 赵振超; 陶明月; 董松岭; 高文明; 李新生*
来源:中国兽医学报, 2023, 43(06): 1156-1161.
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.06.06

摘要

根据鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus, CIAV) HN1415流行株基因组序列(GenBank登录号:MZ668717)设计、合成1对特异性引物及TaqMan探针,经敏感性、特异性以及批内、批间可重复性检验对该方法进行验证。结果显示:该方法灵敏,10拷贝/μL病毒即可检出;特异性强,与FAdV-4、IBDV、AIV、IBV、ALV以及NDV等临床常发禽类传染病病原均无交叉反应;重复性好,批内及批间变异系数均小于1%。结果表明,本试验成功建立了检测CIAV的TaqMan荧光定量PCR方法。用该方法对采自中国不同养鸡地区的253份疑似CIAV感染病例进行检测,阳性检出率在41.18%~62.50%之间,其中广东省的阳性检出率最低(41.18%),山东省阳性检出率最高(62.50%)。对阳性检出样品随机测序验证结果显示,本试验建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR方法可快速、准确检出CIAV,为CIAV的快速确诊提供了重要工具。

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