miR-129-5p在胃癌组织、细胞系中表达及其对细胞增殖和侵袭能力的影响

作者：戴春; 于永进; 谭明; 丁永斌^*

来源：山东医药, 2020, 60(19): 5-8.

• 胃癌
• 微小RNA-129-5p
• 细胞增殖
• 细胞侵袭

目的检测微小RNA-129-5p(miR-129-5p)在胃癌组织及细胞系中的表达,并探讨其对细胞增殖和侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR法检测70例胃癌术后患者癌及癌旁正常组织中miR-129-5p表达,分析其与患者临床病理特征和预后间的关系。根据胃癌组织中miR-129-5p的中位表达量,将患者分为miR-129-5p高表达组和miR-129-5p低表达组,比例两组的1年总生存率。采用实时荧光定量PCR法检测胃癌细胞系(SGC-7901、MKN-45和BGC-823)和正常胃黏膜细胞系(GES-1细胞)中miR-129-5p表达。使用Lipofectamine3000将miR-129-5p模拟物、miR-129-5p抑制剂及miR-129-5p阴性对照序列Scramble转染对数期BGC-823细胞系,并分成miR-129-5p mimic组、miR-129-5p inhibitor组及miR-NC组。采用CCK-8法及Transwell实验分别测定细胞增殖及侵袭能力。结果胃癌组织中miR-129-5p相对表达量低于癌旁正常组织(P <0. 01);胃癌细胞系(MKN-45、BGC-823和SGC-7901)中miR-129-5p相对表达量低于GES-1细胞系(P均<0. 01)。miR-129-5p表达与肿瘤大小和淋巴结转移有关(P均<0. 05),与患者年龄﹑性别﹑组织分化程度及TNM分期无关(P均﹥0. 05)。miR-129-5p低表达组1年总生存率低于miR-129-5p高表达组(P <0. 001)。转染后24 h,miR-129-5p mimic组、miR-NC组、miR-129-5p inhibitor组OD值分别为1. 03±0. 03、1. 93±0. 05、2. 25±0. 08,三组比较,P <0. 01;转染后48 h的OD值分别为1. 22±0. 03、2. 31±0. 06、3. 02±0. 18,三组比较,P <0. 01;转染后72 h的OD值分别为2. 25±0. 03、3. 11±0. 06、4. 02±0. 15,三组比较,P <0. 01。细胞集落形成实验结果显示,miR-129-5p mimic组、miR-NC组、miR-129-5p inhibitor组细胞集落数目分别为(42±5)、(68±7)、(210±13)个,三组比较,P <0. 01。Transwell实验结果显示,miR-129-5p mimic组、miR-NC组、miR-129-5p inhibitor组侵袭细胞数分别为(20±3)、(48±5)、(82±3)个,三组比较,P <0. 01。结论 miR-129-5p在胃癌组织及细胞系中表达均下调,miR-129-5p可抑制胃癌细胞增殖,降低细胞侵袭能力。

• 单位
  江苏省人民医院; 扬中市人民医院