摘要
为研究藏獒体细胞的生物学特性,保存藏獒遗传资源,以实验室前期自主分离的藏獒肾脏细胞为材料,探讨了其体外培养的形态特征、传代次数、冻存复苏、生长特性、细胞核型以及G418最低致死浓度。结果表明:藏獒肾脏细胞体外培养时形态均为成纤维细胞,形状梭形,呈放射状与旋涡状样式生长;细胞冻存后复苏活率为91%,且复苏后形态与长势均呈现良好状态;F1代至F5代,细胞增殖较快,F5代至F8代,细胞增殖减弱甚至停滞,细胞呈多边形状态,出现细胞脱落现象,最终于F8代无法继续生长;生长曲定结果显示,24孔板内细胞数目最高值达到4.06 ×105个/mL,最短倍增时间为27 h;藏獒核型2n=78;藏獒肾脏细胞的G418筛选最低致死浓度为500 μg/mL。
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