PTEN基因的克隆及其在HepG2细胞中的表达

作者：吴园园; 张利; 肖继贤; 朱晓钰; 纪军; 孙喜琢; 张众

来源：临床与实验病理学杂志, 2006, (04): 473-476.

DOI：10.13315/j.cnki.cjcep.2006.04.024

• 肿瘤抑制基因
• PTEN基因
• 分子克隆
• 真核表达载体
• 转染

目的克隆人抑癌基因PTEN全长cDNA,构建其真核表达载体并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达。方法采用RT-PCR法从人正常肝组织中扩增PTEN全长cDNA,将之与pMD18-T Simple Vector连接、测序,获得PTEN基因。将该基因与pcDNA3·1(+)载体连接,构建pcDNA3.1-PTEN真核表达载体。用该载体转染HepG2细胞,RT-PCR检测PTEN的表达。结果酶切和测序证实PTEN基因克隆和真核表达载体构建成功。HepG2-PTEN细胞中PTEN mRNA的表达显著高于未转染的HepG2细胞。结论人抑癌基因PTEN在人肝癌细胞系HepG2细胞中能够高效、稳定地表达,为其在肝癌基因治疗研究中的应用奠定了基础。

• 单位
  大连市中心医院; 中心实验室; 大连医科大学