科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 基于miR-320/E2F转录因子1(E2F1)轴探讨天南星提取物对肺癌细胞顺铂耐药的影响及相关机制。方法 本实验时间为2020年9月至2021年6月。取对数期A549/DDP细胞分为空白组和天南星组，空白组置于RPMI 1640培养基中常规培养，天南星组置于加入天南星提取物的RPMI 1640培养基中常规培养。另取对数期A549/DDP细胞，转染miR-320抑制质粒后随机分为转染组、转染联合天南星组，转染组置于RPMI 1640培养基中常规培养，转染联合天南星组置于加入天南星提取物的RPMI 1640培养基中常规培养。培养48 h后进行后续实验。采用qRT-PCR检测不同细胞系及四组miR-320相对表达量，采用MTT法检测四组不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率，并计算半数抑制浓度(IC50)；采用流式细胞术检测细胞凋亡率，采用双荧光素酶实验验证miR-320与E2F1的靶向关系，采用Western blotting法检测E2F1蛋白相对表达量。结果 16HBE细胞系miR-320相对表达量高于A549/DDP细胞系(P<0.001)。与空白组比较，天南星组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高，IC50、E2F1蛋白相对表达量降低，转染组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率降低，IC50、E2F1蛋白相对表达量升高(P<0.05)；与天南星组比较，转染联合天南星组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率降低，IC50、E2F1蛋白相对表达量升高(P<0.05)；与转染组比较，转染联合天南星组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高，IC50、E2F1蛋白相对表达量降低(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示，E2F1是miR-320的一个靶基因，两者结合位点是E2F1的3’-UTR片段。结论 天南星提取物可逆转肺癌细胞顺铂耐药，促进肺癌细胞凋亡，其机制可能与调控miR-320，进而靶向下调E2F1表达有关。
-
单位辽宁省人民医院; 辽宁省肿瘤医院
