抗凋亡基因bcl-2 cDNA表达型质粒的构建及序列分析

作者：何庆; 苏京; 刘铭; 王保平; 王晶; 陈克勤; 尹潍

来源：天津医科大学学报, 2004, 10(01): 14-17.

DOI：10.3969/j.issn.1006-8147.2004.01.004

• bcl-2基因
• 克隆
• 逆转录聚合酶链反应
• 表达型质粒
• 序列分析

目的 :克隆抗凋亡基因bcl-2,并构建其表达型质粒 ;进行序列分析 ,为基因转染作准备。方法 :应用PCR定向克隆技术 ,克隆SD大鼠鼠脑bcl-2全编码cDNA序列 ;应用双脱氧末端终止法进行重组质粒中bcl-2的cDNA序列分析 ;利用基因重组技术 ,将bcl-2全编码cDNA序列 ,导入pCMV -Tag -1表达型质粒。结果 :成功地克隆SD大鼠bcl-2全编码cDNA序列 ,并将其成功地导入pCMV -Tag -1表达型质粒 ;经序列分析 ,发现bcl-2全编码序列与GeneBank中的相应序列相比 ,有3个碱基出现差别 ,分别为171位a→g,233位a→c ,530位 g→a,均为同义突变。结论 :为抗凋亡基因bcl-2对胰岛细胞的转染研究提供了实验基础

• 单位
  天津医科大学; 天津医科大学总医院