LC-MS/MS在线部分还原法快速表征雷珠单抗一级结构

作者：李佳婧; 温学美; 刘菊; 潘红娟^*

来源：中国医药工业杂志, 2023, 54(11): 1624-1635.

DOI：10.16522/j.cnki.cjph.2023.11.012

• 雷珠单抗
• 质谱
• 二硫键
• 肽图

首次建立了在线部分三(2-羧乙基)膦还原法，通过LC-MS/MS一次进样采集分析，同时对雷珠单抗(1批参比制剂和2批样品)的肽图和二硫键进行表征。结果表明，肽图序列覆盖度均可达100%，鉴定到的翻译后修饰主要为氧化、脱酰胺化和焦谷氨酸环化；除确认与理论连接一致的5对二硫键外，该方法能够鉴定到游离半胱氨酸和3对错配二硫键；烷基化试剂的加入能有效降低样品前处理过程中产生的错配概率。该研究采用在线处理方法，缩短了处理和分析时间，减少了人为引入的不可控因素，为高通量抗体结构的表征提供了参考。

• 单位
  中国医药工业研究总院; 上海医药工业研究院; 创新药物与制药工艺国家重点实验室