摘要
目的:探讨选择性COX-2抑制剂塞莱昔布对幽门螺杆菌(H.pylori)蛋白质组的影响.方法:双向凝胶电泳技术(2-DE)分离塞莱昔布处理前后的H.pylori标准株26695全菌蛋白,银染法凝胶染色,图像扫描分析软件识别差异蛋白,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALD-TOF-MS)、串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析差异蛋白;SYBRGreenⅠ实时定量PCR测定差异蛋白基因的表达变化.结果:塞莱昔布处理后,H.pylori标准株26695发现17个蛋白质斑点表达有差异.7个蛋白质斑点得到阳性鉴定,分别归为H.pylori的3种蛋白质:热休克蛋白60(HSP60),即groEL,延伸因子(EF-TU),谷氨酰转肽酶(GGT).与DMSO溶媒对照相比,塞莱昔布处理后的H.pyloriHSP60(groEL)、EF-TU、GGT表达下调.实时定量PCR测定显示,编码H.pyloriEF-TU、GGT基因的mRNA水平降低(0.07±0.06vs1.01±0.16;0.31±0.13vs0.98±0.01,均P<0.05),而编码H.pyloriHSP60(groEL)基因的mRNA水平增加(1.85±0.26vs1.07±0.27,P<0.05).结论:塞莱昔布通过下调H.pyloriEF-TU、GGTmRNA的表达减低其蛋白的表达;而其对HSP60蛋白质表达的下调作用不发生在mRNA转录水平.塞莱昔布可能通过调节H.pylori致病相关蛋白的表达影响其致病性.
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单位北京大学第一医院