多重聚合酶链反应检测革兰阴性杆菌中质粒介导ampC基因

作者：汪雅萍; 应春妹; 史超颖; 张灏; 于嘉屏

来源：检验医学, 2007, (04): 380-382.

• 质粒介导
• ampC基因
• 多重聚合酶链反应 Plasmid-mediated
• AmpC genes
• Multiplex polymerase chain reaction

目的运用多重聚合酶链反应(PCR)检测革兰阴性杆菌的质粒ampC基因,了解该基因在我院的流行情况。方法采用头孢西丁初筛试验筛选出符合头孢菌素酶(AmpC)表型筛选条件的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌共50株,通过热裂解法进行DNA抽提,采用6组ampC特异引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳区分PCR产物,进一步DNA测序确定其基因型。结果50株试验菌中有8株为阳性,分别为肺炎克雷伯菌5株,大肠埃希菌3株,基因型为CIT型1株,DHA型4株,EBC型3株。结论我院质粒介导ampC基因型主要为DHA型、EBC型和CIT型。多重PCR是特异性高、简便检测质粒ampC基因型的分子生物学方法。

• 单位
  上海交通大学; 上海交通大学医学院附属仁济医院