CIK细胞对RNAi沉默PD-L1基因的肺腺癌A549细胞的体外抑制作用

作者：蒋涛; 付立业; 李妍

来源：现代肿瘤医学, 2015, 23(12): 1641-1643.

DOI：10.3969/j.issn.1672-4992.2015.12.04

• PD-L1
• CIK
• 肺腺癌
• RNAi

目的:观察沉默肺癌A549细胞的程序性死亡受体1(programmed death ligand 1,PD-L1)基因表达后,CIK细胞对其体外抑癌的作用。方法:分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),加入细胞因子(cytokine,CK),体外细胞因子诱导为杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIK cells)。将已构建的PD-L1 shRNA重组质粒p GPU6/PD-L1,应用脂质体转染法转染入A549细胞。RT-PCR法检测PDL1基因的表达;Western blotting法检测PD-L1蛋白的表达;CCK8法检测CIK细胞对各组A549细胞的杀伤率。结果:成功将p GPU6/PD-L1转染入A549细胞;RT-PCR结果显示p GPU6/PD-L1使A549细胞PDL1基因表达水平降低;Western blotting结果显示p GPU6/PD-L1转染A549细胞使PD-L1蛋白表达减少;CCK8结果显示p GPU6/PD-L1能够增强CIK细胞对A549细胞的体外抑瘤能力。结论:下调肺癌细胞A549的PD-L1 mRNA表达,MTT证明能够增强CIK细胞对其体外杀伤作用。

• 单位
  中国医科大学附属第一医院