α烯醇化酶靶向RNA干扰对原代培养乳鼠心肌细胞能量代谢及收缩功能的影响

作者：朱理安; 方宁远; 高平进; 金贤; 汪海娅

来源：中华高血压杂志, 2008, (01): 41-45.

DOI：10.16439/j.cnki.1673-7245.2008.01.005

• α烯醇化酶
• RNA干扰
• 心肌细胞 α-enolase
• RNA interference
• Myocardial cells

目的采用RNA干扰技术抑制培养大鼠心肌细胞α烯醇化酶的表达,探讨α烯醇化酶对心肌细胞能量产生和收缩功能的影响。方法针对α烯醇化酶基因,化学合成3对小片段干扰RNA(siRNA)(分别为针对α烯醇化酶mRNA 406～425位点的序列1,针对α烯醇化酶mRNA 656～675位点的序列2及针对α烯醇化酶mRNA 754～773位点的序列3)并转染原代培养的WKY大鼠心肌细胞。采用Real-time RT-PCR和Western blot技术分别在mRNA和蛋白水平检测α烯醇化酶的表达情况,筛选其中沉默效应最好的序列(序列1)转染心肌细胞,即RNA干扰实验组,以未转染siRNA的心肌细胞为对照组,...

• 单位
  上海交通大学医学院附属瑞金医院; 上海交通大学医学院附属仁济医院; 上海市高血压研究所