基于棉花BAC文库的大片段核DNA的提取方法

作者：殷剑美; 张天真

来源：分子植物育种, 2004, (03): 354-357.

• 大片段DNA
• 提取
• BAC文库
• 棉花 Meg-base DNA
• Preparation
• BAC library
• Cotton

本实验在基因组大片段DNA的提取方法上,结合棉花的特殊性,作了一些改进。即首先将幼苗进行暗培养,减少了叶绿体和酚类等物质的影响;随后在Wash buffer中加入酚结合剂PVP40(polyvinylpyrroli-done),较好地去除了棉酚等次生物质的干扰;另外在细胞核分离过程中,增加了低速稍离心去沉淀的步骤但之前不需要过滤,较好地去除了不溶性杂质。此方法所提取得到的棉花基因组DNA,分子量约在1Mb左右,碎片较少,基本上无蛋白质和细胞器DNA等污染。其质量完全满足构建BAC文库的要求。