紫外线诱导的Molt-4细胞旁观者效应的研究

作者:黄丹; 杨长永; 陶德定; 冷彦; 胡俊波; 龚建平
来源:华中科技大学学报(医学版), 2008, (03): 336-338+422.
DOI:10.3870/j.issn.1672-0741.2008.03.015

摘要

目的探讨紫外线诱导的凋亡细胞是否具有旁观者效应。方法将Molt-4细胞分为阴性对照组、DID对照组、空白对照组和细胞密度分别为2×105/ml和8×105/ml的两个实验组。每个实验组细胞被平分为两部分:一部分作为效应细胞,被标记示踪剂DID染料并予以UV照射40s;另一部分作为旁观者细胞,不经任何特殊处理。细胞联合培养共24h,每4h收获1次。运用Annexin V-FITC/PI法检测旁观者细胞的细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜检测旁观者细胞的形态学变化。结果阴性对照组、DID对照组和空白对照组在0、4、8、12、16、20和24h各个时间点细胞凋亡率均小于5%。2×105/ml实验组旁观者细胞凋亡率在0~24h分别为3.47%、4.58%、7.32%、10.41%、14.82%、19.37%和25.66%。8×105/ml实验组旁观者细胞凋亡率在相应时间点分别为3.76%、5.77%、10.17%、14.71%、18.92%、32.28%和38.90%。与对照组相比,实验组旁观者细胞凋亡率随时间的延长而明显升高,且旁观者细胞凋亡率随细胞密度增高而增加。对旁观者细胞进行激光共聚焦显微镜检测,发现一些经典的凋亡和坏死表现,如细胞染色体浓集、磷脂酰丝氨酸翻转、凋亡小体形成、细胞崩解等。结论经紫外线照射的Molt-4细胞对旁观者细胞具有旁观者效应,且该效应与细胞密度相关。

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