环状RNA circKDM4B调控肝癌细胞增殖及侵袭迁移的实验研究

作者：马晓武; 谭文亮; 杨磊; 谢智钦; 王庆斌; 陈亚进; 商昌珍^*

来源：岭南现代临床外科, 2021, 21(06): 614-624.

DOI：10.3969/j.issn.1009?976X.2021.06.005

• 肝细胞癌
• 环状RNA
• 增殖
• 凋亡
• 迁移

目的探索环状RNA circKDM4B对肝癌细胞增殖、凋亡和侵袭迁移的影响,明确其在肝癌进展中所发挥的调控作用。方法采用核糖核酸酶R(RNase R)消化实验和荧光原位杂交实验(FISH)验证circKDM4B的环状结构稳定性及其在细胞中的定位;利用小干扰RNA(siRNA)敲减肝癌细胞circKDM4B的表达,并通过qRT-PCR实验验证敲减效率;采用细胞计数方法(CCK-8)实验、EdU增殖实验检测circKDM4B对肝癌细胞增殖的影响,流式细胞技术检测其对肝癌细胞凋亡的影响;同时应用划痕实验、Transwell实验检测circKDM4B对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响。结果相较于线性KDM4B mRNA,circKDM4B对RNase R耐受性更加稳定,FISH结果显示circKDM4B主要定位于肝癌细胞质中;在转染了circKDM4B siRNA后,circKDM4B在肝癌细胞表达下调,而亲本基因KDM4B不受影响。CCK-8和EdU增殖实验结果显示,敲减circKDM4B可抑制肝癌细胞的增殖;流式细胞实验显示敲减circKDM4B可明显促进肝癌细胞凋亡;划痕实验和Transwell实验表明敲减circKDM4B后肝癌细胞的侵袭和迁移能力明显减弱。结论 circKDM4B稳定表达于肝癌细胞质中,并具有促进肝癌细胞增殖、侵袭迁移、抑制肝癌细胞凋亡的能力,这提示circKDM4B有望成为新的肝癌治疗靶点。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院