H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白在杆状病毒中的表达及其免疫效力评估

作者：郭晓琴; 张谞霄; 马诚太; 欧杰; 李柏林^*; 李鑫^*

来源：江苏农业学报, 2022, 38(01): 143-150.

• H7N9亚型禽流感病毒
• 重组杆状病毒
• 血凝素
• 免疫原性

旨在利用杆状病毒表达系统构建1株对高致病性H7N9亚型禽流感病毒(A/Chicken/Huizhou/HZ-3/2016)攻击后的家禽提供保护的候选疫苗株。用同源重组的方法构建1株表达H7N9亚型禽流感病毒(A/chicken/Shaoxing/5201/2013株)血凝素(Hemagglutinin, HA)蛋白的重组杆状病毒。用PCR技术鉴定重组杆状病毒rBac-SX5201HA的遗传稳定性，用间接免疫荧光方法和Western Blotting方法鉴定HA蛋白的表达情况，用血凝试验检测HA蛋白的体外活性，继而对重组疫苗在无特定病原体(Specific pathogen free, SPF)鸡上进行免疫效力试验，并对免疫后21 d的SPF鸡血清进行抗体检测，对攻毒5 d后的鸡咽喉和泄殖腔棉拭子进行病毒分离。结果显示，重组杆状病毒rBac-SX5201HA在昆虫细胞中生长良好，且可稳定高效表达H7 HA蛋白，血凝效价可达26;重组疫苗免疫SPF鸡21 d后可诱导28.4血凝抑制(Hemagglutinin inhibition, HI)抗体效价并能抵抗高致病性H7N9亚型禽流感病毒的攻击，免疫组SPF鸡群均未发病或死亡，仅有17%的SPF鸡在攻毒后第5 d出现排毒。可以看出，重组疫苗对高致病性H7N9亚型禽流感病毒攻击后的SPF鸡提供了100%的保护，且可有效抑制病毒在SPF鸡体内的复制。

• 单位
  上海海洋大学