微波冻融法预处理用于酵母菌落PCR检测

作者：李闯; 彭志清; 李寅琛; 吴升山; 林鹿; 曾宪海^*

来源：福建农林大学学报（自然科学版）, 2022, 51(05): 705-712.

DOI：10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2022.05.018

• 酿酒酵母
• 菌体预处理
• 菌落PCR
• 微波
• 冻融

为实现酵母阳性转化子的高效筛选，亟需寻找一种快速、简便的菌落PCR方法用于酵母的分子遗传鉴定.以酿酒酵母为底盘微生物，转化重组质粒或染色体整合片段，挑选抗性筛选单菌落，采用不同预处理方法处理菌体以进行菌落PCR检测，并对结果进行分析.相比其他预处理方法，使用微波冻融法制备的模板进行菌落PCR检测，稳定性好、检测性能强，适用于短链DNA以及3 000 bp以上目的片段的扩增；同时，该方法可进行毕赤酵母阳性克隆的筛选.表明微波冻融法通用性较强，制备的模板适合不同遗传背景以及基因操作方式下酵母菌落PCR检测.

• 单位
  厦门大学