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摘要
为了建立快速有效的罗非鱼无乳链球菌病早期诊断方法以便服务于及时疫情预警，试验通过双抗体夹心ELISA法确定罗非鱼不同组织(血液、脑、肝、头肾和脾)无乳链球菌阴/阳性临界值后，对感染无乳链球菌不同感染剂量(50cfu/m L、100cfu/m L、200cfu/m L和400cfu/m L)、不同感染时间(12 h、24 h、48 h、72 h、96h、120 h、144 h、168 h)罗非鱼的不同组织样品中的病原抗原进行检测。结果显示，双抗体夹心ELISA法确定脑、头肾、肝、脾及血清中抗原的阴/阳临界值分别为:0.192、0.198、0.196、0.173和0.163;感染后12 h处理组脑组织OD450值均显著高于对照组(P<0.01);除24 h外感染组头肾组织OD450值远大于对照组，且差异具有时间依赖性(P<0.01);感染后24 h肝组织OD450值达到峰值，96 h恢复正常值;感染后12 h，脾脏组织OD450值显著高于对照组(P<0.05);感染后12h血清OD450值极显著高于对照组(P<0.01),24 h恢复正常，72 h～96 h显著升高。研究表明，感染后12 h，脑、头肾、脾及血清均能检出无乳链球菌抗原，表明双抗体夹心ELISA法检测敏感性好，适合罗非鱼无乳链球菌病的早期病原检测;脑、脾、头肾、肝、血清等均可作为检测无乳链球菌抗原的样本，但是感染后不同时间、不同组织的细菌含量可能不同，建议同时检测不同组织以确保结果更准确。
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