本发明涉及一种酶催化制备酪氨酸寡肽和接枝单甲氧基聚乙二醇的方法,属于酶催化技术领域。使用蛋白酶为催化剂催化合成酪氨酸寡肽,然后在寡聚酪氨酸寡肽的氨基末端接枝单甲氧基聚乙二醇,制备得到酪氨酸寡肽-单甲氧基聚乙二醇共聚物。产率达到15~55%。本发明涉及的聚肽合成步骤的催化剂为酶,具有反应条件温和、环境更友好、副反应少等优点,而且避免了繁琐的保护和去保护步骤,从而提供了一种制备氨基酸聚肽-单甲氧基聚乙二醇的新方法。