地西泮scFv-Fc抗体的制备及其酶联免疫吸附检测方法的建立

作者：徐泽华; 孙铁强; 韩振宇; 刘肖; 张樱樱; 范龙兴; 白家磊; 宁保安^*

来源：解放军预防医学杂志, 2020, 38(10): 73-78.

DOI：10.13704/j.cnki.jyyx.2020.10.026

• 地西泮
• 纳米抗体
• ELISA
• 融和表达

目的制备、鉴定高灵敏度、可溶性的地西泮(Diazepam, DZP)scFv-Fc抗体。方法通过传统的基因工程技术构建scFv-Fc重组质粒并转染FreeStyleTM 293F细胞进行表达和纯化;采用间接竞争ELISA的方法对抗体性质进行评价。结果制备了抗地西泮scFv-Fc抗体;与亲代地西泮单克隆抗体相比,其灵敏度提高了约2倍;与6种地西泮结构类似物基本上没有明显的交叉反应,表明该抗体具有良好的特异性;与经典的高效液相色谱法相比,与其测定的加标回收率和相对标准偏差具有良好的一致性。结论本研究中成功获得了高灵敏度和可溶性scFv-Fc抗体,为后续建立基于基因工程抗体的DZP快速免疫检测法提供了参考。

• 单位
  福州大学; 公共卫生学院; 内蒙古医科大学