黑素瘤相关抗原D4(MAGE-D4)多克隆抗体的制备和应用

作者：贺菽嘉; 顾永耀; 肖绍文; 张庆梅; 陈芳; 罗彬; 付骏; 谢小薰

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2017, 33(01): 104-108.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008055

• 黑素瘤相关抗原D4(MAGE-D4)
• 多克隆抗体
• 肿瘤相关抗原

目的制备兔抗人黑素瘤相关抗原D4(MAGE-D4)多克隆抗体,鉴定其免疫学特性,并进行初步应用。方法对构建的p MAL-C2/MAGE-D4重组质粒进行原核表达及纯化,获得MBP/MAGE-D4融合蛋白,并以此蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。抗体经蛋白A凝胶柱亲和层析法纯化后,通过SDS-PAGE检测其纯度;间接ELISA、Western blot法检测抗体的效价及特异性;免疫组织化学染色法检测肺癌组织中MAGE-D4的表达及定位。结果获得纯度较高的抗MAGE-D4多克隆抗体,ELISA检测抗体的效价为1∶256 000,Western blot法分析显示MAGE-D4多克隆抗体可特异性识别MAGE-D4重组蛋白,免疫组织化学结果表明,该抗体能识别肺癌组织中的内源性MAGE-D4蛋白,表达的阳性率为69.6%(17/23)。结论制备的MAGE-D4多克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度。

• 单位
  广西医科大学; 广西医科大学第一附属医院