血供的机制*补肾固胎合剂通过调控PKA/CREB/AQP5通路改善流产模型大鼠子宫蜕膜组织及螺旋动脉

作者：甘雨娟; 张迎春^*; 萧闵; 刘佳文; 刘菏婧; 潘琴; 徐瑶瑶

来源：世界科学技术-中医药现代化, 2023, 1-8.

• 水通道蛋白
• 流产大鼠模型
• 螺旋动脉
• 补肾固胎合剂
• 血管内皮生长因子

目的 观察补肾固胎合剂通过PKA-CREB信号通路对羟基脲片联合米非司酮诱导的流产大鼠模型子宫血供的作用及安胎机制。方法 将SPF级SD大鼠以2∶1比例合笼，制备孕鼠60只，依其妊娠顺序随机分为6组，每组10只，分别为正常组、模型组、补肾固胎合低、中、高剂量剂组(0.5、1.0、2.0 g·kg-1)，及地屈孕酮组(3.02 mg·kg-1)。除正常组外，余下每组采用妊娠1-9天羟基脲灌胃(450.0 mg·kg-1)，妊娠第10天予米非司酮灌胃(4.0 mg·kg-1)复制流产模型。妊娠第1-9天，给予对应药物灌胃治疗，模型组和正常妊娠组予等量0.9%生理盐水灌胃。末次给药24 h取子宫蜕膜组织；苏木素-伊红(HE)染色观察子宫蜕膜组织中螺旋动脉管腔直径及管壁厚度；免疫组化学染色方法(IHC)检测血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在蜕膜组织中的表达，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组孕鼠子宫蜕膜组织中磷酸化蛋白激酶A(Phosphorylated protein kinase A,p-PKA)、蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(Phosphorylated cyclic adenosine monophosphate response element binding protein,pCREB)、cAMP反应元件结合蛋白(Cyclic Adenosine monophosphate response element binding protein,CREB)、水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)的蛋白表达情况；DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法检测蜕膜细胞凋亡水平。结果 与模型组比较，螺旋动脉管壁厚度均高于其他组(P<0.05)管腔直径均低于其他组(P<0.05),VEGF蛋白表达量低于其他组(P<0.05)；与模型组比较，补肾固胎合剂高、中、低剂量组和地屈孕酮组流产大鼠子宫蜕膜组织蜕膜细胞凋亡水平不同程度的减轻。补肾固胎合剂可上调流产大鼠子宫蜕膜组织p-PKA/PKA、p-CREB/CREB水平(P<0.01)，促进AQP5蛋白的表达(P<0.01)，具有统计学意义。结论 补肾固胎合剂可以通过激活PKA、CREB磷酸化，上调AQP5表达水平，促进螺旋动脉生理性重铸以及VEGF的高表达，发挥改善流产大鼠子宫血供的作用。

• 单位
  湖北中医药大学; 湖北省妇幼保健院; 第一临床学院