1种人类血小板抗原1～17及Cab等位基因全血直接检测方法的建立

作者：张肄鹏; 黄志平; 聂冬梅; 郑望春; 刘卫东

来源：国际检验医学杂志, 2017, 38(14): 1895-1900.

DOI：10.3969/j.issn.1673-4130.2017.14.009

• 人类血小板抗原
• Cab
• 亚型
• 聚合酶链反应

目的结合靶序列富集多重聚合酶链反应(TEM-PCR)、荧光探针溶解曲线SNP分型和血液直接PCR技术,建立一种方便、准确的人类血小板抗原(HPA)等位基因分型方法。方法 TEM-PCR方法设计HPA117、Cab这18种HPA亚型等位基因的引物及荧光探针,使用血液直接PCR酶同时扩增血液标本中的18个等位基因目标片段,并利用荧光探针的溶解温度变化区分不同SNP位点。结果 TEM-PCR可同时扩增18个等位基因的目标片段,并通过溶解峰的Tm值变化区分SNP位点,结果与序列特异性引物聚合酶链反应位点相比较有相同的准确度,且操作更为简便,无需提取血液基因组DNA,无PCR后续电泳步骤,减少污染风险。结论成功建立了1种基于TEM-PCR,血液直接PCR和荧光探针溶解曲线分析技术检测HPA117,Cab等位基因。

• 单位
  深圳市龙华区中心医院; 深圳市血液中心