免疫功能正常的HBV cccDNA小鼠模型用于苦参碱和青蒿素抑制H B V的药效评价

作者：伍悦; 吕小琴; 刘阳; 向霞; 赵中华; 徐如青; 潘朔寒; 何明忠; 张华堂; 赖国旗^*

来源：实验动物与比较医学, 2021, 41(02): 108-130.

• 乙型肝炎病毒
• 慢性感染
• 药效评价
• 苦参碱
• 青蒿素
• CBA/CaJ小鼠

目的应用免疫功能正常的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)小鼠模型评价中药苦参碱和青蒿素的作用效果,同时为模型应用奠定基础。方法体外合成H B V共价闭合环状D N A(covalently closed circular DNA,cccDNA),通过尾静脉高压注入8～10周龄的雄性CBA/CaJ小鼠体内,然后分别在急性感染期和慢性感染期腹腔注射苦参碱或青蒿素。定量P C R法检测小鼠血清及肝组织中H B VD N A和c c c D N A含量,酶联免疫吸附法检测血清中H B V表面抗原(HBV surface antigen,HBsAg)的含量,免疫组织化学法检测肝组织中HBsAg和HBV核心抗原(HBV core antigen,HBcAg)的表达。结果在HBV急性感染期,注射苦参碱和青蒿素第4周即能够明显抑制小鼠血清中HBsAg的分泌(均P <0.05),降低血清中HBV DNA的表达(均P <0.01)。在H B V慢性感染期,苦参碱和青蒿素对小鼠血清和组织中H B s A g的抑制作用不明显(均P>0.05),但是血清中HBsAg相对降低水平(?HBsAg)明显大于生理盐水对照组(均P <0.05);而且苦参碱能降低小鼠血清或组织中HBV DNA(P <0.05,P <0.01)和组织中HBV cccDNA的拷贝数(P <0.05);青蒿素仅能明显抑制小鼠血清中HBV DNA拷贝数(P <0.01),而对组织中HBV DNA和HBVcccDNA的作用不明显(均P> 0.05);另外,苦参碱对肝组织中HBcAg的作用不明显(P> 0.05),而青蒿素对HBcAg有明显的抑制作用(P <0.05)。结论免疫功能正常的HBV cccDNA小鼠模型能够用于治疗急性期和慢性期乙型肝炎的药物疗效评价。

• 单位
  重庆市科学技术研究院; 重庆医科大学附属第二医院; 重庆医科大学