摘要

目的应用多重PCR技术对蜡样芽孢杆菌毒力基因进行快速检测,为研究蜡样芽胞杆菌致病性提供有力依据。方法根据蜡样芽胞杆菌(B. cereus)的cer、hbl A、hbl C、nhe A、nhe B、cyt K和bce T基因设计并合成引物,优化反应条件,应用多重PCR技术检测120株B. cereus毒力基因序列。结果多重PCR检测结果非常理想,不同基因扩增条带清晰可辨,蜡样芽胞杆菌呕吐毒素基因cer携带率为96. 66%(116/120),细胞毒素cyt K基因携带率为42. 37%(50/118),肠毒素bce T基因携带率为38. 33%(46/120),非溶血性基因nhe A携带率为78. 33%(94/120),非溶血性基因nhe B携带率为83. 05%(98/118),溶血性基因hbl A携带率为55. 0%(66/120),溶血性hbl C基因携带率为27. 96%(33/118)。结论多重PCR结果很好,7对引物所扩增出的DNA条带区分明显,电泳条带清晰,特异性强,敏感度高。本实验对120株蜡样芽胞杆菌7种毒力基因进行检测,为研究蜡样芽胞杆菌致病性提供有力依据。