兰州百合DNA提取方法比较及RAPD体系的快速优化

作者：崔文娟; 林玉红; 欧巧明; 石有太; 罗俊杰

来源：甘肃农业科技, 2017, (01): 8-12.

• 兰州百合
• DNA提取
• RAPD-PCR
• 体系优化

以兰州百合鳞片和叶片为试材,采用改良CTAB法获得了高质量的基因组DNA。为优化兰州百合RAPD-PCR反应体系,利用正交试验设计,对兰州百合RAPD-PCR反应体系中的5种主要因素进行4水平共计16个组合设计,并选用3种反应程序,通过琼脂糖凝胶电泳结果分析,最终获得最佳反应体系为:20 u L反应体系中含30 ng模板DNA、0.5μmol/L随机引物、0.2 mmol/L d NTPs、2.25 mmol/L MgCl2,及1.5U Taq DNA聚合酶。最佳反应程序:94℃预变性4 min;94℃变性1 min,36℃退火1.5 min;72℃延伸2 min;35个循环;最后72℃延伸7min。

• 单位
  甘肃省农业科学院生物技术研究所