稀有密码子对人源Id2基因表达的影响

作者：杨伟; 周华; 赵沙沙; 金丽; 郭珍; 张绍城; 陈检; 汪德强

来源：重庆医科大学学报, 2013, (04): 365-369.

• Id2
• 突变
• 表达
• 纯化 Id2
• mutation
• expression
• purification

目的:通过对人Id2基因的稀有密码子进行突变并构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌(escherichia coli,E.coli)中表达Id2蛋白,分析稀有密码子对Id2基因表达的影响。方法:PCR扩增突变Id2基因序列,然后转入E.coli BL21中进行表达,利用镍离子亲和层析、离子交换层析及分子筛纯化。结果:正确构建了Id2基因的基因突变表达质粒,基因突变表达的Id2蛋白在E.coli BL21中为可溶性上清表达,成功纯化了目的蛋白,且分子筛结果显示其在溶液中呈现二聚体状态。结论:稀有密码子对Id2蛋白在E.coli BL21中大量可溶性上清表达有重要影响。

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院; 重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院