旱稻孢囊线虫ISSR反应体系的建立与优化

作者：崔思佳; 王水南; 丁中; 彭德良; 黄文坤

来源：湖南农业大学学报(自然科学版), 2016, (03): 301-304.

DOI：10.13331/j.cnki.jhau.2016.03.015

• 旱稻孢囊线虫
• ISSR–PCR
• 反应体系
• 反应优化

采用正交设计对旱稻孢囊线虫ISSR–PCR反应体系的4因素(Taq酶、模板DNA、d NTPs、引物)在4个用量水平上进行优化试验。结果表明,旱稻孢囊线虫ISSR–PCR最佳的反应体系为:在25μL反应体系中,含Taq DNA聚合酶(5 U/μL)0.3μL﹑模板DNA 1μL﹑d NTPs(2.5 mmol/L)2μL﹑引物(10μmol/L)1μL﹑10×PCR Buffer(20 mmol/L Mg2+plus)2.5μL。引物UBC887最适退火温度为48℃。优化的旱稻孢囊线虫ISSR–PCR的反应体系和程序有较好的重复性和稳定性。

• 单位
  中国农业科学院植物保护研究所; 植物病虫害生物学国家重点实验室; 湖南农业大学