摘要
目的:探讨力生长因子(mechano-growth factor,MGF)对周期性牵张力(cyclic stretch,CS)作用下人牙周膜细胞成骨分化及MMP1、MMP-2表达的影响及其作用机制。方法:分离培养人牙周膜细胞(human periodontal ligamentcells, hPDLCs),将si-MGF转染细胞,用MGF刺激或MEK/EKR通路抑制剂U0126进行干预,以Flexercell应力加载系统对细胞施加形变率10%、频率0.1 Hz的周期性牵张应力;采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)试剂盒检测ALP活性;qRT-PCR检测MGF及成骨分化基因ALP、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的转录水平,Western免疫印迹检测对MEK/EKR1/2信号通路的影响。采用SPSS19.0软件包对结果进行统计学分析。结果:CS呈时间依赖性促进hPDLCs中MGF的表达(P<0.05)。与对照组相比,转染si-MGF显著抑制细胞中MGF的表达(P<0.05),沉默MGF显著抑制CS诱导的hPDLCs中ALP的活性(P<0.05)及成骨分化相关基因ALP、Runx2及OPN的转录(均P<0.05)。与CS处理组相比,沉默MGF后,CS诱导的MMP-1及MMP-2的水平显著降低(P<0.05);刺激MGF则进一步加强CS诱导的成骨分化及MMP-1、MMP-2的表达。沉默MGF可抑制CS激活的p-ERK的表达,而刺激MGF则进一步促进p-ERK的表达(P<0.05)。U0126预处理显著降低MGF加强的促成骨分化及MMP的表达(P<0.05)。结论:MGF通过MEK/ERK1/2信号通路的活化参与周期性牵张力作用下牙周膜细胞的成骨分化及MMP表达。
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单位中国人民解放军西藏军区总医院; 中国人民解放军空军军医大学