基于NHS基团修饰的副溶血性弧菌免疫磁珠制备及其富集性能评价

作者：刘阳; 刘文侠; 孙力军; 施琦; 邱妹; 邓旗

来源：安徽农业科学, 2018, 46(06): 1-32.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2018.06.001

• NHS基团
• 副溶血弧菌
• 免疫磁珠
• 富集

[目的]制备NHS基团修饰的副溶血弧菌免疫磁珠并评价其富集性能。[方法]采用偶联率确定免疫磁珠最佳制备条件(磁珠粒径、偶联时间和抗体加入量),采用捕捉率确定免疫磁珠最佳富集条件(菌悬液p H、孵育时间和免疫磁珠加入量),并通过方法的特异性、灵敏度、精密度和稳定性评价免疫磁珠富集性能。[结果]0.1 m L N2型NHS磁珠可与0.2 m L副溶血弧菌抗血清偶联2 h制备IMBVP,加入到副溶血弧菌菌悬液(p H 7.07.4)中孵育2 h,IMBVP最佳工作液体积为0.4 m L。该方法特异性好、灵敏度高(15 cfu/50 m L)、精密度高(批内变异系数和批间变异系数均在3%6%)、稳定性好(准确度大于91%)。[结论]自制副溶血弧菌免疫磁珠富集性能好,方法工作效率高,成本低,为副溶血弧菌高效快速检测提供了可靠的富集手段。

• 单位
  国家海产品质量监督检验中心（湛江）; 广东海洋大学; 国家海产品质量监督检验中心(湛江)