布鲁氏菌Irr蛋白的生物信息学分析、表达纯化以及ELISA方法的初步建立

作者：孙天浩; 张倩; 曹旭东; 李楠; 程科建; 张江伟; **; 陈创夫

来源：中国动物传染病学报, 2021, 1-13.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20210611.009

• 布鲁氏菌
• Irr蛋白
• 原核表达
• 生物信息学
• 间接ELISA方法

为建立一种检测布鲁氏菌抗体的间接ELISA检测方法，本研究对Irr蛋白进行生物信息学分析、原核表达，用纯化的重组蛋白Irr作为包被抗原，建立了一种检测布鲁氏菌抗体的间接ELISA方法。结果显示，重组蛋白Irr包被量为0.25μg，5％脱脂奶粉封闭2h，一抗稀释浓度1:500孵育2h，二抗稀释浓度1:5000孵育2h，显色15min时建立的间接ELISA方法条件最优，该方法的临界值为OD_(450nm )0.55，与凝集实验的符合率达到96.7%，同具有较好的特异性和重复性。综上所示，本研究基于Irr蛋白建立了操作简单、特异性高、重复性好的血清学间接ELISA 检测方法，为布鲁氏菌病的诊断和流行病学调查提供了技术支持。

• 单位
  动物科技学院; 新疆农垦科学院; 石河子大学