提高内毒素去除效果的质粒DNA层析纯化工艺的优化

作者：王贻杰; 刘勇; 程海; 范文玲; 韩建; 霍烛; 郝彦玲; 邵一鸣

来源：中国生物制品学杂志, 2009, (01): 81-84.

DOI：10.13200/j.cjb.2009.01.86.wangyj.003

• 质粒DNA
• 内毒素
• 层析
• EDTA
• SDS Plasmid DNA
• Endotoxin
• Chromatography
• SDS

目的优化质粒DNA分子筛或离子交换层析工艺,提高内毒素去除效果。方法在经精胺沉淀初步纯化的质粒DNA溶液中,加入不同浓度的EDTA(5、10和20mmol/L)或SDS(0.1%、0.2%和0.5%),分别进行Sephacryl S-1000分子筛层析及Source30Q离子交换层析,收集质粒峰,测定内毒素含量。结果用含0.5%SDS的质粒溶液进行分子筛层析,用含10～20mmol/L EDTA或0.1%～0.5%SDS的质粒溶液进行离子交换层析,质粒DNA的内毒素含量均<5EU/mg。结论添加一定浓度的EDTA或SDS可提高质粒DNA分子筛层析或离子交换层析去除内毒素的效果。综合考虑安全性因...

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心