RNAi法分析广东虫草热激蛋白40 CgDnaJ05基因功能

作者：郝转; 张成花; 黄秋菊; 黄浩; 李泰辉; 王刚正^*; 邓旺秋^*

来源：菌物学报, 2022, 41(11): 1786-1795.

DOI：10.13346/j.mycosystema.220308

• 广东虫草
• CgDnaJ05
• 菌丝生长
• 原基形成

DnaJ蛋白(热激蛋白40)在机体生长发育和适应逆境环境过程中起着重要作用。以广东虫草GDGM30035为材料，克隆获得CgDnaJ05基因，CDS为2361bp，编码786个氨基酸，生物信息学分析结果表明CgDnaJ05蛋白含有DnaJ蛋白结构域，属于碱性、不稳定和亲水性蛋白质。以CgDnaJ05蛋白DnaJ保守结构域240 bp的反向互补片段为干扰片段，构建CgDnaJ05基因的双向启动子沉默载体；通过根癌农杆菌Agrobacteriumtumefaciens介导转化法侵染广东虫草菌丝，筛选获得9个相对稳定的CgDnaJ05沉默转化子。qRT-PCR分析表明，转化子CgDnaJ05相对表达量下调至野生型菌株的20%–82%；与野生菌丝相比，转化子菌丝生长速度显著下降，且CgDnaJ05下调越明显，菌丝减缓速度越显著，同时，转化子原基的形成受到显著抑制。研究表明：广东虫草CgDnaJ05基因明显影响广东虫草菌丝生长和原基形成，对广东虫草生长发育具有重要的调控作用。

• 单位
  生命科学学院; 广东省科学院; 渭南师范学院; 广东省菌种保藏与应用重点实验室