摘要
目的 研究抵抗素对血管平滑肌细胞表型转化的影响,探索其可能的分子机制。方法 取生长状态良好的人血管平滑肌细胞(HVSMCs),使用不含胎牛血清的高糖细胞培养基培养24 h进行同步化,各组分别用抵抗素(50μg/L)和二甲双胍(2 mmol/L)处理细胞,然后通过流式细胞术检测细胞周期变化,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及骨桥蛋白(OPN)的基因表达,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测信号通路蛋白腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其磷酸化(p-AMPK、p-mTOR)表达水平,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平。结果 与对照组比较,抵抗素(Res)组G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例增加;α-SMA基因表达降低,OPN基因表达升高;p-AMPK表达降低,p-mTOR及Cyclin D1表达增加(P<0.05)。与抵抗素组比较,经二甲双胍预处理后(Res+Met组)可以逆转以上变化。结论 抵抗素可能通过抑制AMPK/mTOR信号通路,上调细胞周期蛋白Cyclin D1表达,促进细胞进入S期,诱导血管平滑肌细胞表型转化。二甲双胍可减轻抵抗素对血管平滑肌细胞表型转换的影响,有潜在抑制冠脉移植血管增殖、重塑及减轻狭窄的作用。
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单位山西医科大学; 山西省中西医结合医院; 山西省心血管病医院