摘要
目的探讨姜黄素促进阿糖胞苷对人急性髓系白血病KG1a细胞株增殖抑制和凋亡的分子机制。方法将细胞分为9组:空白对照组、4个不同浓度(20,40,60,80μmol·L-1)姜黄素组(分别命名为姜黄素-1,-2,-3,-4组)和4个不同浓度(20,100,500,2 500 nmol·L-1)阿糖胞苷组(分别命名为阿糖胞苷-1,-2,-3,-4组),测定各组细胞的增殖抑制率,筛选最佳浓度,以半数致死率的姜黄素浓度(40μmol·L-1,姜黄素-2组)联合上述4个不同浓度阿糖胞苷组(命名为联合-1,-2,-3,-4组),处理24和48 h,测定各组细胞凋亡率,筛选出最佳浓度的联合组(阿糖胞苷-3组+姜黄素-2组),测定凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase3)、Cleved caspase-3、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)和细胞色素C(CytC)释放的表达水平(灰度值)。结果处理24 h,空白对照组、阿糖胞苷-3组、姜黄素-2组和最佳联合组的细胞增殖抑制率分别为(1.22±0.29)%,(33.80±1.00)%,(21.17±2.27)%和(45.26±1.13)%;这4组的凋亡率分别为(0.18±0.23)%,(4.96±1.42)%,(8.10±1.32)%和(13.45±1.03)%;这4组的Bcl-2蛋白表达水平分别为2.01±0.56,0.71±0.24,0.63±0.31和0.22±0.19;这4组的Cleved caspase-3/Caspase-3的比值分别为0.86±0.22,1.14±0.34,1.23±0.29和1.52±0.47;这4组的线粒体CytC与内参蛋白的比值分别为1.30±0.21,1.53±0.37,1.92±0.24和2.17±0.29。阿糖胞苷组和姜黄素组的上述指标与空白对照组比较,或联合组的上述指标与阿糖胞苷组和姜黄素组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。48 h结果同上。结论姜黄素可以增加白血病细胞对阿糖胞苷的敏感性,可通过调节Caspase3的活化、调节Bcl-2蛋白及CytC的表达诱导白血病细胞KG1a产生凋亡。
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