RNA干扰趋化因子受体CXCR7基因对黑素瘤M14细胞侵袭和迁移的影响

作者：刘排; 田蔚蔚; 李小静^*; 李志锋; 燕霞; 孙建方^*

来源：中华皮肤科杂志, 2015, 48(12): 856-859.

• 黑色素瘤, 实验性
• 受体, CXCR7
• RNA干扰
• 肿瘤侵润
• 细胞迁移分析

目的探讨靶向沉默趋化因子受体CXCR7基因对黑素瘤细胞株M14侵袭和迁移能力的影响。方法采用Western印迹实验检测黑素瘤M14和A375细胞CXCR7蛋白的表达, 选取高表达CXCR7蛋白的M14细胞作为研究对象。将M14细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组:实验组转染CXCR7-siRNA, 阴性对照组转染阴性对照siRNA, 空白对照组不做任何处理。采用实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测CXCR7 mRNA和蛋白在M14细胞中的表达水平, Transwell小室法及细胞划痕法检测干扰前后细胞侵袭及迁移能力的变化。结果实验组M14细胞CXCR7 mRNA及蛋白相对表达量分别为0.412 ± 0.023、0.144 ± 0.005, 明显低于阴性对照组(1.211 ± 0.117、1)以及空白对照组(1.000 ± 0.102、1.016 ± 0.004), 差异均有统计学意义(F值分别为30.068、11 485.5, P值分别为0.001、0.000)。实验组M14细胞穿过聚碳酸酯膜的细胞数为(20.617 ± 1.503)个, 明显少于阴性转染对照组[(42.000 ± 6.018)个]和空白对照组[(43.627 ± 2.152)个], 3组间比较差异有统计学意义(F= 32.416, P= 0.001)。划痕实验中, 实验组每高倍视野(× 200)下细胞迁移数为15.00 ± 1.10, 明显少于阴性对照组(44.90 ± 2.20)和空白对照组(45.30 ± 2.30), 3组间比较差异有统计学意义(F= 2 411.945, P= 0.000)。结论靶向沉默CXCR7能显著抑制黑素瘤M14细胞的侵袭和迁移, 有望为皮肤黑素瘤提供潜在的治疗靶点。

• 单位
  江西省皮肤病专科医院; 中国医学科学院北京协和医学院; 河北工程大学附属医院