杨树MADS转录因子SVL基因克隆、原核表达与多克隆抗体制备

作者：王冬莉; 刘芸杉; 孟森; 卞展^*

来源：西北林学院学报, 2022, 37(03): 82-87.

• 杨树
• MADS转录因子
• PtSVL
• 原核表达
• 多克隆抗体

为研究杨树MADS转录因子相关基因在逆境中的作用，以84K杨树叶片的cDNA为模板，通过PCR扩增得到了开放阅读框为684 bp、氨基酸个数为227的PtSVL基因；构建原核表达载体pET-B2M-PtSVL-3×FLAG,并在大肠杆菌B21(DH3)中大量表达。结果表明，获得的PtSVL-3×FLAG融合蛋白，大小为42.0 ku,主要以包涵体形式存在；用纯化后的蛋白免疫新西兰公兔制备PtSVL多克隆抗体；间接ELISA法和Western blot检测后多克隆抗体后显示其效价高，特异性好。获得的PtSVL多克隆抗体将为后续鉴定PtSVL蛋白的互作蛋白提供基础。

• 单位
  重庆三峡学院; 中国林业科学研究院热带林业研究所