新型冠状病毒中和抗体两种检测方法的建立与评价

作者：张旭东; 李泽平; 王琪; 李玉彬; 秦伟涛; 段学军^*

来源：标记免疫分析与临床, 2021, 28(05): 858-863.

• 新型冠状病毒
• 中和抗体检测
• 酶联免疫法

目的建立基于酶联免疫法(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)双抗原夹心法和竞争抑制法的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体检测方法,并评价两种方法的检测性能。方法使用基因重组刺突蛋白受体结合域(spike protein receptor binding domain, S-RBD)作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记另1株基因重组蛋白SARS-CoV-2 S-RBD,建立S-RBD双抗原夹心法。使用基因重组人血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记S-RBD蛋白,建立竞争抑制法。优化各自的反应体系,使整个系统达到最佳检测性能,并对两种检测方法进行对比评价。结果两种方法的灵敏度相近,临界值附近的重复性夹心法为7.51%,竞争抑制法为10.70%;未接种疫苗且核酸阴性的人群样本,两种方法的特异性均为100%;已接种疫苗的人群样本,夹心法的阳性检出率为75.0%,竞争抑制法为71.4%,与金斯瑞生物科技股份有限公司生产的新冠病毒中和抗体检测试剂盒(ELISA)的检测结果相比,Kappa指数分别为0.9、0.81,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论成功建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体双抗原夹心法和竞争抑制法两种酶联免疫检测方法,夹心法的重复性优于竞争抑制法。两种检测方法与已上市的同类产品的差异没有统计学意义,具有一定的临床应用价值。

• 单位
  北京北方生物技术研究所