PMSG免疫学检测方法的建立

作者：于艳昌; 严慧; 李闰婷; 张英杰; 齐伟民; 段春辉; 刘月琴^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2019, (17): 12-15.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.12.0269

• 孕马血清促性腺激素(PMSG)
• 马属动物
• 早孕检测
• 抗体
• ELISA
• 吸光度值

为了建立一种马属动物孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)浓度的检测方法,试验使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测商用PMSG抗原纯度,斑点印迹杂交(Dot-blot)判断PMSG和抗体是否结合,蛋白免疫印迹杂交(Western-blot)确定抗体和PMSG抗原的结合方式,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)建立PMSG浓度-吸光度值标准曲线,并拟合方程。结果表明:PMSG抗原纯度符合要求,抗体与PMSG抗原采用空间表位方式结合;PMSG浓度与OD450值的标准曲线拟合方程为y=0.004 5x+0.020 2,R2=0.998,在0～4×102IU/m L范围内,PMSG浓度与OD450值之间高度相关,R2>0.99。说明PMSG抗原可与抗体通过空间表位方式特异性结合,所建立的PMSG免疫学检测方法具有较高的准确性。

• 单位
  动物科技学院; 河北农业大学