摘要
目的 研究他克莫司(FK506)和嘌呤霉素(PAN)对肾小球足细胞凋亡和α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)mRNA及蛋白表达的影响,探讨FK506对足细胞的保护作用。方法 体外培养小鼠肾小球足细胞,设置对照组、PAN组和FK506组,处理8 h、24 h、48 h后观察细胞形态,检测细胞凋亡率,并收集细胞进行实时荧光定量-PCR、Western blot检测α-actinin-4的mRNA及蛋白表达情况。结果 PAN组各时间段胞体面积较对照组明显缩小,FK506组胞体面积较PAN组增大。8 h时各组间足细胞凋亡率无明显差异(均P>0.05);24 h及48 h时PAN组足细胞凋亡率[(8.21±0.41)%、(16.32±0.17)%]较对照组[(4.28±0.35)%、(6.27±0.28)%]明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),FK506组足细胞凋亡率[(6.26±0.24)%、(13.32±0.24)%]均明显低于PAN组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。8 h时各组α-actinin-4 mRNA和蛋白表达无明显差异(均P>0.05),24 h、48 h时PAN组mRNA(2.42±0.21、3.78±0.25)和蛋白(0.77±0.04、1.22±0.10)表达量较对照组mRNA(1.50±0.22、2.15±0.15)和蛋白(0.44±0.03、0.83±0.07)显著增高,差异均有统计学意义(均P<0.01);FK506组mRNA(1.65±0.24、1.70±0.32)和蛋白(0.52±0.05、0.56±0.07)表达量均明显低于PAN组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 FK506可有效抑制PAN对足细胞的损伤作用,稳定α-actinin-4的表达,为临床应用FK506治疗肾小球疾病提供依据。
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