转cry1Ac基因抗虫水稻环介导等温扩增检测方法的建立及应用

作者：于妍; 李志辉; 王志鑫; 张先舟; 张伟; 檀建新; 束长龙; 张杰; 张永军

来源：河北农业大学学报, 2013, (04): 86-91.

DOI：10.13320/j.cnki.jauh.2013.04.018

• 转cry1Ac基因抗虫水稻
• 环介导等温扩增
• 转基因作物
• 检测 transgenic insect-resistant rice with cry1Ac gene
• loop-mediated isothermal amplification
• genetically modified crops
• detection

为了方便快速地检测转cry1Ac基因抗虫水稻的转基因成分,本研究以转cry1Ac基因水稻‘华恢1号’为主要研究对象,根据环介导等温扩增技术的原理,针对人工改造的cry1Ac晶体蛋白毒素基因的6个区段设计4条特异性引物,在65℃条件下,利用链置换DNA聚合酶等温扩增1h,分别通过荧光显色和凝胶电泳完成对转基因作物的检测工作,同时对2种转基因作物和5种非转基因作物进行LAMP检测以检验该方法的特异性。结果表明,该LAMP方法能有效地检测含有cry1Ac的转基因作物,检测结果与常规PCR方法结果一致,灵敏度是PCR方法的10倍,达到0.01%,并且具有高特异性,表明该检测方法适合转cry1Ac基因抗...

• 单位
  中国农业科学院; 河北农业大学; 植物病虫害生物学国家重点实验室