MARCKS磷酸化对冷刺激诱导人气道上皮细胞MUC5AC分泌的影响

作者：李敏超; 尤列·皮尔曼; 周向东

来源：中南大学学报(医学版), 2012, (05): 447-452.

• 豆蔻酰化富丙氨酸激酶C底物
• 瞬时受体电位melastatin离子通道
• 黏蛋白类 myristoylated alanine-rich C kinase substrate
• transient receptor potential melastatin cation channels
• mucin

目的:构建豆蔻酰化富丙氨酸激酶C底物(MARCKS)磷酸化位点(PSD)突变体,并探讨瞬时受体电位M8离子通道(TRPM8)及MARCKS在冷刺激诱导黏蛋白(MUC)5AC合成及胞吐过程中发挥的作用。方法:利用PCR克隆全编码MARCKS目的基因,并通过定点突变技术将PSD的4个丝氨酸突变为天冬氨酸编码基因。将野生型及突变体cDNA亚克隆至pcDNA3.0载体后用酶切及DNA测序鉴定。以TRPM8特异性阻断剂BCTC、重组突变质粒转染人气道上皮16HBE细胞为干预手段,用免疫荧光及ELISA检测二者对冷空气刺激诱导的16HBE细胞合成及分泌MUC5AC的影响。结果:成功构建了pcDNA3.0-...

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院