基于体内外实验探讨蒙药七味清肝散对大鼠肝纤维化的作用及机制

作者：高晓阳; 金蓉; 颜羽昕; 张春艳; 赵晓璐; 马月宏^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(11): 2046-2054.

• 七味清肝散
• 肝纤维化
• 微小RNA-21
• PTEN/PI3K/Akt信号通路

目的：探讨蒙药七味清肝散在大鼠肝纤维化（hepatic fibrosis,HF）模型及肝星状细胞（HSC-T6）中的作用及机制。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组及低剂量（135 mg/kg）、中剂量（270 mg/kg）和高剂量（405 mg/kg）七味清肝散组，每组6只。模型组和各给药组大鼠灌胃50%四氯化碳（CCl4）溶液（2 mL/kg），同时各给药组每天予以相应剂量的七味清肝散灌胃8周。采用全自动生化分析仪检测肝血清生化指标[丙氨酸转氨酶（ALT），天冬氨酸转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）]及羟脯氨酸（HYP）含量；HE和Masson染色观察肝组织损伤情况；Western blot检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I型胶原蛋白（collagen type I,Col I）、磷酸酶与张力蛋白同源物（PTEN）、PI3K及Akt蛋白表达水平。将HSC-T6细胞分组并进行miR-21模拟剂（mimics）/抑制剂（inhibitor）转染，MTT法检测细胞活力；RT-qPCR检测HSC-T6细胞中miR-21的表达水平，及细胞转染后对α-SMA、Col I、PTEN、PI3K和Akt mRNA表达水平的影响；Western blot检测HSC-T6细胞中α-SMA、Col I、PTEN、PI3K和Akt的蛋白表达水平。结果：不同剂量的七味清肝散能改善肝功能，并减轻肝纤维化程度；与模型组相比，各剂量给药组的细胞A值显著降低（P<0.05,P<0.01）。七味清肝散显著下调HSC-T6细胞中miR-21表达（P<0.01）;miR-21mimics显著升高α-SMA、Col I、PI3K和Akt的mRNA表达水平（P<0.01），下调PTEN的mRNA表达（P<0.05），而miR-21 inhibitor使上述指标mRNA表达水平显著逆转（P<0.05）。七味清肝散处理后大鼠肝组织和HSC-T6细胞中α-SMA、Col I、PI3K及Akt蛋白水平下调，PTEN蛋白水平上调（P<0.05）。结论：蒙药七味清肝散可能通过下调miR-21影响PTEN/PI3K/Akt信号通路来减轻大鼠的肝纤维化水平。

• 单位
  基础医学院; 内蒙古医科大学