猪瘟病毒NS3蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备

作者：常天明; 孙元; 李宏宇; 贺番; 李淼; 黄俊华; 仇华吉

来源：中国兽医科学, 2010, (02): 144-149.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.02.013

• 猪瘟病毒
• NS3基因
• 单克隆抗体 classical swine fever virus
• NS3 gene
• monoclonal antibody

以含有猪瘟病毒(CSFV)石门株全长cDNA的重组质粒pOKShimen为模板,经PCR扩增获得NS3基因,利用原核表达载体pMAL-c2X、pET32a以及杆状病毒表达载体pFastBacH T B表达CSFV石门株NS3基因,获得3种重组蛋白:MBP-NS3、His-NS3和rNS3。Western-blot分析及间接免疫荧光试验证实,这3种不同载体表达的NS3蛋白均能被猪瘟阳性血清所识别。利用直链淀粉树脂柱对重组蛋白MBP-NS3进行纯化后,用其免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,用间接ELISA筛选,获得2株能稳定传代并分泌针对抗CSFVNS3蛋白单克隆抗体的细胞株,命...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 内蒙古农业大学