PDCD4重组慢病毒载体的构建、包装及其对前列腺癌细胞增殖的影响

作者：张克克; 张小芳; 王福利; 张翔; 武**; 王磊; 杨安钢; 张瑞; 袁建林

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2013, (06): 609-612.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006807

• PDCD4
• 慢病毒
• 前列腺癌
• 细胞增殖

目的构建表达程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的慢病毒表达载体,建立能够稳定表达目的基因的前列腺癌PC3细胞亚株。研究PDCD4分子对前列腺癌细胞增殖的影响。方法利用PCR扩增PDCD4编码区片段,克隆入pENTRA-3C入门载体,利用LR clonaseⅡ重组酶将目的基因片段转接入pLenti-6.3慢病毒表达载体并包装相应的慢病毒,以表达红色荧光蛋白mCherry的pLenti-6.3-mCherry慢病毒载体包装的慢病毒为对照,感染人前列腺癌PC3细胞,通过杀稻瘟素(blasticidin)筛选出能够稳定过表达PDCD4蛋白的细胞亚株。利用Western blot法检测PDCD4蛋白的表...

• 单位
  第四军医大学; 西京医院